同源重组法构建枯草芽孢杆菌dhb C基因缺失突变株和回复株

• 作者: 余贤美 李锐 杨芩 林超 贺春萍 郑服丛
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 同源重组 缺失突变 基因回复
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 作物病虫害及其防治
• 页码范围: 1517-1521
• 页数: 5页
• 分类号: Q81|Q93
• 字数: 3160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2009.10.024

摘要

为了验证dhbC基因的功能,以质粒pEGFP-NI为模板,通过PCR扩增获得新霉素抗性基因(neo~r)DNA片段,构建重组质粒pMD18-neo,电击转化法将pMD18-neo导入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CAS15感受态细胞中,使neo'基因片段与dhbC基因片段发生置换,获得dhbC基因缺失突变株.再通过电击转化将dhbC 基因全长编码序列导入dhbC基因缺失突变株CAS15 dhbC-del,获得dhbC基因回复株CAS15 dhbC-com.经CAS平板法检测表明,CAS15 dhbC-del不能产生橘黄色晕圈,而CAS15 dhbC-tom产生与CAS一致的橘黄色晕圈,证明了dhbC基因与嗜铁索的合成密切相关.