利用枯草芽孢杆菌芽孢展示人APPsw蛋白

• 作者: 于妍 张莹莹 徐大庆 李志辉 李英军 杜萍萍 檀建新 申培立 马雯
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 枯草芽胞杆菌 芽胞表面展示 淀粉样前体蛋白 CotG GFP
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 页码范围: 95-99
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2014.0120

摘要

为了获得经济高效的人淀粉样前体样蛋白(APPsw)的抗原,本试验将枯草芽孢杆菌的芽胞衣壳蛋白CotG的启动子及其编码序列与穿梭载体pDG150进行重组,构建了芽孢表面展示载体pDG150-cotg.克隆了绿色荧光蛋白(GFP)基因gfp和人淀粉样前体蛋白基因APPsw,并插入pDG150-cotg的多克隆位点构建重组质粒,分别转化枯草芽孢杆菌168,获得工程菌G168和A168.G168芽孢在荧光显微镜下可观察到绿色荧光,表明GFP得到展示;A168的芽孢通过western bolt检测,检测到102 kDa大小条带,表明本研究构建的表面展示载体pDG150-cotg能将APPsw展示在芽孢表面,为后续的免疫试验提供了疫苗材料.