肠出血性大肠杆菌z4832基因缺失突变株的构建

• 作者: 李涛 王建新 王慧 谭林林
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 Red重组系统 乙酰转移酶 抗生素
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1111-1115
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.93
• 字数: 3910字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用Red重组系统的同源重组功能,敲除肠出血性大肠杆菌O157∶H7 (EHEC O157∶H7)的乙酰转移酶基因z4832,构建z4832基因缺失突变株.方法 EHECO157∶H7的基因组作为模板,PCR扩增目的基因两侧的同源臂序列;将上下游同源臂连接于pUC19-kana质粒上卡那霉素(kana)抗性基因的两端;PCR扩增获得中间嵌合卡那霉素抗性基因的同源臂线性片段,利用质粒pKD46介导的重组技术敲除z4832基因,利用pCP20质粒介导的重组技术去除抗性标记.PCR扩增及DNA测序验证目的基因缺失后,测定突变株及野生株的生长曲线,检测在抗菌药物氧氟沙星中的存活率.结果 成功构建EHEC O157∶H7 z4832基因缺失突变株.z4832缺失突变株生长速度与野生株差异无统计学意义,但在含氧氟沙星的LB培养基中突变株存活率升高(P＜0.05),在含氧氟沙星的M9培养基中存活率下降(P＜0.05).结论 构建z4832缺失突变株,研究z4832与肠出血性大肠杆菌耐药性之间的关系,为进一步研究乙酰转移酶在EHEC O157∶H7中的作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李涛	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	16	28	4.0	5.0
2	谭林林	安徽医科大学军事医学科学院微生物流行病研究所	1	0	0.0	0.0
6	王建新	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	0	0.0	0.0