肠出血性大肠杆菌O157:H7 z0986-z1444双缺失突变株构建

• 作者: 李崭 李涛 王建新 王慧 苏莉 陈芳红 黄洁
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 肠出血性大肠杆菌 Red重组系统 三型分泌系统
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 155-159
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.93
• 字数: 3748字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.02.001

摘要

目的 采用Red重组方法敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 z0986和z1444基因,构建双缺失突变株.方法 首先构建z0986、z1444打靶片段;其次以电击法转化感受态细胞,之后通过PCR鉴定所得菌株;最终所得阳性单克隆测定生长曲线.结果 z1444单基因缺失突变株(Δz1444/933)及z0986-z1444双基因缺失突变株(Δz0986/Δz1444/933)构建成功,其生长曲线与野生型EHEC O157:H7差异均无统计学意义.结论 z0986与z1444基因缺失对EHEC的生长无影响.构建Δz1444/933及Δz0986/Δz1444/933为深入研究z1444基因的功能及作用机制奠定了基础.