猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白2分段真核表达及其细胞定位分析

• 作者: 张升波 徐丽 李昌红 杨佰启 林汉卿 温贵兰 田浪 管国丹
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2 真核质粒 转染 间接免疫荧光检测
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 65-68
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 1951字
• 语种: 中文

摘要

为探讨非结构蛋白2(non-structural protein 2,NSP2)在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制过程中的作用及机制,本研究构建真核重组质粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并瞬时转染至HEK293T中,同时设置完整NSP2基因序列重组质粒作为对照,转染48 h后分别用不同的抗体进行间接免疫荧光监测.结果 显示,转染对照组中细胞核周围可见特异性荧光,而转染真核重组质粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323后,不仅在细胞核周围,在细胞核内也可以观察到特异性荧光.本研究成功构建真核重组质粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并可在HEK 293T细胞中正确表达,为进一步研究NSP2在PRRSV复制过程中的作用提供依据和基础.