树鼩脊髓星形胶质细胞的分离鉴定

• 作者: 孙晓梅 张志成 李娜 王文广 王璇 袁园
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 星形胶质细胞 脊髓 分离鉴定 树鼩
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-20
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4489字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.01.004

摘要

目的 建立树鼩脊髓来源的星形胶质细胞的体外分离、鉴定方法以及原代培养技术.为体外利用树鼩星形胶质细胞开展相关研究提供实验材料.方法 给新生树鼩实施安死术后采集脊髓组织,于解剖显微镜下去除脊髓膜和血管,减少成纤维细胞、血管内皮细胞和红细胞的影响,然后使用胰蛋白酶和DNase I联合消化脊髓组织,分离培养.根据星形胶质细胞和成纤维细胞、小胶质细胞的贴壁时间差异,使用差速贴壁法去除成纤维细胞;然后在细胞铺满后,使用恒温摇床振荡的方式去除少突胶质细胞;通过连续3次纯化,去除神经元.对所培养的细胞进行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)细胞免疫荧光染色鉴定.结果 采用胰蛋白酶和DNase I联合消化后差速贴壁培养,能够分离获得星形胶质细胞.细胞具有典型的原浆型和纤维型特征,原浆型呈多角状,突起少而粗壮;纤维型突起丰富且向外铺展开;细胞免疫荧光结果显示GFAP表达阳性,且纯度可达到95％.结论 成功建立了树鼩的脊髓星形胶质细胞的体外分离纯化培养方法.