2型猪链球菌细胞分裂蛋白GpsB的原核表达及其鉴定

• 作者: 侯红芬 张会芳 曹祥荣 朱旭辉 潘秀珍 王长军 胡丹 郑峰
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 2型猪链球菌 GpsB 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 201-205
• 页数: 5页
• 分类号: R378.1
• 字数: 3027字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2019.00.007

摘要

目的 利用原核表达系统诱导表达2型猪链球菌(Streptococcus suis 2,S.suis 2)分裂相关因子GpsB重组蛋白,为后续研究奠定基础.方法 以S.suis 2菌株05ZYH33全基因组DNA为模板,经PCR扩增得到目的基因片段.目的基因经双酶切后连接至表达载体pET32a,转化大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)DH5α感受态细胞.重组质粒经测序鉴定正确后转化E.coli BL21感受态细胞.获得的重组表达菌经IPTG诱导表达目的蛋白.利用Ni离子亲和层析柱纯化重组蛋白,并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定.利用重组蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体.结果 成功构建出重组表达载体pET32agpsB,并经IPTG诱导表达出目的蛋白.重组蛋白主要存在于表达菌裂解液上清中,分子质量约30 kD,与预期大小一致.Western blot检测发现,该蛋白能被His-Tag单克隆抗体特异性识别.制备的多克隆抗体能特异性识别重组GpsB蛋白(rGpsB).结论 成功表达和纯化了rGpsB并获得了该蛋白的多克隆抗体,为进一步研究该蛋白在S.suis 2分裂过程中的作用鉴定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹祥荣	南京师范大学生命科学学院	65	388	11.0	17.0
2	侯红芬	南京师范大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
6	张会芳	南京师范大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
10	胡丹		1	0	0.0	0.0
11	郑峰		1	0	0.0	0.0
12	朱旭辉		1	0	0.0	0.0
13	王长军		3	7	1.0	2.0
14	潘秀珍		2	1	1.0	1.0