猪肾上皮细胞Ⅰ型干扰素受体1敲除对伪狂犬病毒复制的影响

• 作者: 刘晓贺 张爽 李佳佳 杜永坤 段利芳 褚贝贝 邵科宇 郭玉堃 马英先
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肾上皮细胞 Ⅰ型干扰素受体1 伪狂犬病病毒 基因编辑 免疫印迹法 实时定量聚合酶链反应 猪
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 细胞和分子生物学
• 页码范围: 741-746
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2019.06.007

摘要

目的 探讨Ⅰ型干扰素受体1 (IFNAR1)对伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响.方法 以慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建猪肾上皮细胞(PK15)敲除IFNAR1基因的稳定细胞系.运用细胞活力检测、荧光观察、流式细胞术检测、滴度测定、Real-time PCR等技术进行IFNAR1功能验证.结果 随着PRV感染时间延长,敲除IFNAR1基因可以显著促进PRV-TK mRNA的转录,PRV-gE蛋白的翻译以及子代病毒的毒力.结论 IFNAR1在抑制PRV增殖中发挥重要作用.