利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌asaA基因

• 作者: 李磊 王一诺 邹清华
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 鲍曼不动杆菌 基因敲除 VI型分泌系统 asaA
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-18
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4526字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2019.01.003

摘要

目的 利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌ATCC 17978的asaA.方法 设计上下游引物中包含asaA的同源序列,并以pKD4质粒为模板,扩增含有卡那霉素抗性基因的DNA片段.将该片段转化于表达重组酶的17978感受态细胞中,在卡那霉素筛选压力下,得到经两次同源双交换的具有卡那霉素基因标记的突变菌株.随后,在重组酶的作用下将抗性基因去除,最终得到无抗性基因标记的突变菌株ΔasaA.结果 通过该重组系统,首先将卡那霉素抗性基因的DNA片段替换了基因组中asaA的DNA片段,然后将卡那霉素抗性基因的DNA片段消除,最终获得了asaA缺失的突变体.结论 通过Red重组系统为鲍曼不动杆菌中其他基因的缺失突变提供方法与思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李磊	北京大学基础医学院病原生物学系	57	388	11.0	15.0
2	王一诺		1	1	1.0	1.0
3	邹清华	北京大学基础医学院病原生物学系	8	9	2.0	2.0