青蒿素对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞氧化应激损伤的抑制作用

• 作者: 刘华 苏荣健 黄晓旭
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 青蒿素 视网膜色素上皮细胞 老年性黄斑变性 氧化应激
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 306-311
• 页数: 6页
• 分类号: R774
• 字数: 4777字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨青蒿素对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化应激损伤的抑制作用.方法 将ARPE-19细胞接种于96孔板,每孔7×103个细胞,细胞贴壁后分别加入不同浓度青蒿素,筛选对细胞增殖有效的最佳药物浓度.将APRE-19细胞分成4组.对照组:不做特殊处理;过氧化氢组:加入100 μmol·L-1过氧化氢作用细胞24h;青蒿素组:加入青蒿素30 μmol·L-,作用细胞24h;青蒿素预保护组:加入30μmol·L-1青蒿素预保护细胞24h后加入100 μmol·L-1过氧化氢作用24h.利用MTT法筛选青蒿素对ARPE-19细胞作用的最佳药物浓度;通过Hoechst33342染色及线粒体膜电位观测细胞凋亡情况;检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量和活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)阳性细胞数;Western blot法检测相关蛋白表达水平.结果 MTT法检测发现,30 μmol·L-1的青蒿素对细胞增殖作用最强(均为P＜0.01).青蒿素预保护组与过氧化氢组相比,细胞增殖率升高,凋亡细胞数显著减少,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).线粒体膜电位染色显示,青蒿素预保护组与过氧化氢组相比绿色染色减少,红色染色增多,说明青蒿素预保护组凋亡细胞数减少.与对照组相比,青蒿素组ARPE-19细胞中SOD含量显著增加(P＜0.05);与过氧化氢组相比,青蒿素预保护组细胞内SOD含量明显增高(P＜0.05),说明青蒿素能增加细胞内抗氧化物质,减少细胞凋亡.与对照组相比,青蒿素组ROS阳性细胞减少(P＜0.05);与过氧化氢组相比,青蒿素预保护组ROS阳性细胞亦明显减少(P＜0.05),说明青蒿素可减少过氧化氢诱导的活性氧物质积聚.通过Western blot检测发现,青蒿素能促进ARPE-19细胞内AKT的磷酸化,过氧化氢组ARPE-19细胞内Caspase-3、PARP、Keap1相对表达升高,Bcl-2、Nrf2、HO-1降低;青蒿素预保护组ARPE-19细胞内Caspase-3、PARP、Keap1相对表达降低,Bcl-2、Nrf2、HO-1升高,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 青蒿素通过调节Nrf2/keap1信号通路来减小过氧化氢诱导的ARPE-19细胞的氧化应激损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘华		13	14	2.0	3.0
2	苏荣健	锦州医科大学基础医学院	12	15	2.0	3.0