乙型肝炎病毒HBX蛋白与醛缩酶B相互作用的验证

• 作者: 焦伯延 焦佰海 赵福河
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HBx蛋白 醛缩酶B 免疫共沉淀
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 393-395,399
• 页数: 4页
• 分类号: R346
• 语种: 中文

摘要

目的 验证乙型肝炎病毒HBx蛋白与醛缩酶B(ALDOB)存在蛋白相互作用.方法 在CytoTrap细胞质酵母双杂交验证HBx蛋白与ALDOB蛋白发生相互作用的前提下,将HBx编码基因和ALDOB编码基因分别克隆入pFLAG-CMV-2载体和pcDNA3.1/myc-His(-)A载体.转染Huh7肝细胞,经蛋白质印迹法检测融合蛋白表达后,利用免疫共沉淀(CO-IP)进一步验证HBx蛋白与ALDOB蛋白在肝细胞内发生相互作用.结果 CytoTrap细胞质酵母双杂交验证HBx蛋白与ALDOB蛋白可以发生相互作用,并成功构建pFLAG-CMV-2-HBx和pcDNA3.1/myc-His(-)A-ALDOB载体,融合蛋白FLAG-HBx和ALDOB-myc可以在Huh7细胞内表达并能相互沉淀.结论 HBx蛋白和ALDOB蛋白存在直接相互作用.