不同培养基与饲养细胞组合对多房棘球绦虫体外培养模型的影响

• 作者: 张示杰 王泽宇 邓子 韩振阳
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 泡球蚴 体外培养 培养基 饲养细胞 囊泡 葡萄糖 囊液 直径 成囊率 蛋白定量
• 年，卷（期）: 2019,（19）
• 所属期刊栏目: 组织构建实验造模
• 页码范围: 3080-3085
• 页数: 6页
• 分类号: R456|R372
• 字数: 8370字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.1254

摘要

背景:多房棘球绦虫原头节的体外成囊培养是提取与研究其生发层干细胞的实验基础.D-MEM与RPMI-1640是最适宜用于泡球蚴体外培养的商业培养基,HeLa细胞与大鼠肝癌细胞(ATCC No.CRL-1600)也是常用饲养细胞.目的:构建多房棘球绦虫体外培养模型,观察泡球蚴在不同饲养细胞[HeLa细胞与大鼠肝癌细胞(ATCC No.CRL-1600)]及含有体积分数10％胎牛血清的不同培养基[D-MEM(高/低糖型)与RPMI-1640]下生长情况.方法:预先培养HeLa细胞及大鼠肝癌细胞(ATCC No.CRL-1600),从新疆石河子大学第一附属院实验动物中心提供的感染多房棘球绦虫6个月以上的种鼠体内提取原头节后分别与不同饲养细胞及培养基体外共同培养.实验经石河子大学医学院第一附属医院医学伦理委员会批准,批准号:2015-018-01,批准时间:2017-04-07.实验根据饲养细胞与培养基组合分为6组,每组加入1×106饲养细胞与50 mL含体积分数10％胎牛血清的培养基及5000个原头节,Ⅰ组:HeLa细胞与1640培养基培养;Ⅱ组:HeLa细胞与D-MEM(高糖型)培养基培养;Ⅲ组:大鼠肝癌细胞与1640培养基培养;Ⅳ组:大鼠肝癌细胞与D-MEM(高糖型)培养基培养;Ⅴ组:HeLa细胞与D-MEM(低糖型)培养基培养;Ⅵ组:大鼠肝癌细胞与D-MEM(低糖型)培养基培养,观察泡球蚴原头节的生存、生长和发育,每隔7 d计算原头蚴成囊率,使用目镜测微尺测量囊泡平均直径大小.结果与结论:①原头蚴在6种组合中均可长期存活,大部分都形成囊泡,囊泡直径分布在1-6 mm;②培养第56天原头蚴成囊率和囊泡平均直径均为大鼠肝癌细胞与D-MEM(高糖型)培养基组效果最佳(P<0.05),成囊率(72.08±1.79)％,囊泡平均直径(3.379±0.199)mm;③囊泡囊液蛋白定量检测结果显示6组囊液蛋白含量均低于体内囊泡,Ⅳ组蛋白含量高于其他5组(P<0.05);④结果证实:同条件下D-MEM(高糖型)培养基囊泡大小与数量优于其他2种培养基.大鼠肝癌细胞(ATCC No.CRL-1600)作为饲养细胞囊泡大小与数量优于HeLa细胞.D-MEM(高糖型)与大鼠肝癌细胞(ATCC No.CRL-1600)共同作用的环境下原头蚴生长发育的成囊率及囊泡大小最佳,可作为体外培养泡球蚴原头蚴获得囊泡的最优选择.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张示杰	石河子大学医学院	65	308	10.0	14.0
2	邓子	石河子大学医学院	3	1	1.0	1.0
3	韩振阳	石河子大学医学院	1	1	1.0	1.0
4	王泽宇	石河子大学医学院	1	1	1.0	1.0