日本血吸虫外源性短肽干预小鼠巨噬细胞极化

• 作者: 佟娜仁其木格 刘彦 申海艳 邹菊 陈聪
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 多肽 巨噬细胞 碱性磷酸酶
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 120-124,138
• 页数: 6页
• 分类号: R383.24
• 字数: 3802字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15972/j.cnki.43-1509/r.2019.02.002

摘要

日本血吸虫肝硬化与宿主巨噬细胞极化密切相关,本研究为验证多肽干预宿主巨噬细胞极化的分子机制,人工培养小鼠巨噬细胞,分别用单磷酸腺苷、日本血吸虫碱性磷酸酶、外源性短肽处理,ELISA检测各试剂最佳浓度;免疫印迹法检测短肽作用后细胞内一氧化氮合酶以及精氨酸酶1蛋白含量变化;酶联免疫吸附法检测细胞上清液中腺苷浓度的改变,对硝基苯磷酸二钠法检测日本碱性磷酸酶酶活,实时荧光定量PCR法检测细胞上清液中一氧化氮合酶、精氨酸酶1 mRNA的表达变化,硝酸还原酶法测定一氧化氮的浓度,免疫荧光技术鉴别M1和M2型巨噬细胞.结果显示,单磷酸腺苷、碱性磷酸酶及短肽最佳浓度分别为2.5 mmol/L、1.1 mmol/L及0.6 mmol/L;经多肽刺激小鼠巨噬细胞后分泌的一氧化氮合酶的蛋白及mRNA表达均上调,精氨酸酶1表达下调,碱性磷酸酶酶活降低(P<0.01),腺苷受体激活率下降(P<0.01),M1型巨噬细胞增多,M2型巨噬细胞减少.表明多肽通过降低碱性磷酸酶酶活,减少腺苷A合成,从而促进巨噬细胞经典途径激活极化,抑制巨噬细胞替代途径激活极化.