溶血磷脂酸刺激可影响成骨细胞表达结缔组织生长因子

• 作者: 张开伟 徐远坤 胡广
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 溶血磷脂酸 骨折愈合 成骨细胞 骨形成 结缔组织生长因子 蛋白激酶A 蛋白激酶C 骨缺损
• 年，卷（期）: 2019,（19）
• 所属期刊栏目: 骨组织构建
• 页码范围: 2959-2964
• 页数: 6页
• 分类号: R459.9|R392.7
• 字数: 7653字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.1240

摘要

背景:溶血磷脂酸可刺激上皮细胞和成肌细胞表达结缔组织生长因子2,但涉及的分子机制至今仍不清楚.成骨细胞是骨发育和骨折愈合中的重要细胞,其也表达溶血磷脂酸的受体,骨折局部高表达溶血磷脂酸和成骨细胞,且结缔组织生长因子2在骨折愈合中发挥主要作用.目的:研究外源性溶血性磷脂酸对成骨细胞中结缔组织生长因子2表达水平的影响及其分子机制.方法:①体外培养MC3T3-E1细胞,将细胞分为对照组和实验组,对照组仅给予矿化诱导液,实验组在矿化诱导液中加入终浓度为20μmol/L的溶血磷脂酸,刺激0.5,1,2,4,6,8及12 h,提取RNA并检测结缔组织生长因子2 mRNA表达水平;②MC3T3-E1细胞预先经蛋白激酶A抑制剂(H-89)和蛋白激酶C抑制剂(Staurosporine)处理0.5 h,再加入溶血磷脂酸.定量PCR检测结缔组织生长因子2 mRNA表达水平、Western Blot法检测结缔组织生长因子2蛋白表达水平,Western blot法和免疫荧光检测细胞蛋白激酶C转位情况.结果与结论:①溶血磷脂酸作用于MC3T3-E1细胞后,可迅速引起细胞内结缔组织生长因子2 mRNA和蛋白表达水平提高,刺激后2 h其表达量达到峰值,随后表达水平随时间逐渐降低,至8 h和12 h已基本恢复至刺激前的表达水平;②Staurosporine可明显减弱溶血磷脂酸刺激成骨细胞表达结缔组织生长因子2的能力;而H-89则可以使溶血磷脂酸刺激成骨细胞表达结缔组织生长因子2的能力进一步增强;③成骨细胞经溶血磷脂酸刺激15 min后,溶血磷脂酸可明显提高细胞膜蛋白激酶C表达水平,同时胞浆中蛋白激酶C表达水平降低;④结果提示,溶血磷脂酸可刺激成骨细胞表达结缔组织生长因子2,这一过程可能涉及蛋白激酶A和蛋白激酶C途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐远坤	贵阳中医学院第一附属医院骨科	13	88	6.0	9.0
2	张开伟	贵阳中医学院第一附属医院骨科	27	84	5.0	8.0
3	胡广	贵阳中医学院第一附属医院骨科	4	3	1.0	1.0