自噬抑制剂3-MA上调H2O2损伤的PC12细胞氧化应激水平

• 作者: 宋英 王力波 秦东旭 肖燕 艾立瑶
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: PC12细胞 细胞凋亡 过氧化氢 抗氧化酶 6-氨基-3-甲基腺嘌呤 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 528-534
• 页数: 7页
• 分类号: R96|Q255
• 语种: 中文
• DOI: 10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.05.09

摘要

为探究自噬抑制剂6-氨基-3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)对损伤细胞氧化应激水平的影响,将3-MA作用于H2O2诱导的PC12细胞损伤模型,以自噬增强剂雷帕霉素(rapamycin,Rap)作为对照,探讨自噬与氧化应激的关系.测定线粒体的膜电位和细胞内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)与丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,评价损伤细胞的氧化应激状态.单丹(磺)酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)染色,观察损伤细胞的自噬情况.蛋白质印迹分析损伤细胞中的自噬相关蛋白质LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值变化.实验结果显示:与正常组相比,H2O2损伤细胞的ROS水平上升到正常组的141％,MDA含量增加(P＜0.001);CAT与SOD酶活力显著降低(P＜0.001),差异均有统计学意义,证明损伤细胞氧化应激水平增加;MDC染色结果表明,H2O2组自噬明显增加.Western印迹结果表明,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值显著升高(P＜0.05);与损伤组相比,3-MA组MDC染色结果表明,自噬水平降低.Western印迹结果表明,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值下降;细胞内ROS水平升高,增加到正常组的208％.MDA含量增加(P＜0.001),CAT、SOD酶活力降低(P＜0.001).综上结果表明,自噬抑制剂可增加H2O2诱导的PC12细胞损伤模型的氧化应激水平,增加细胞凋亡.