心血管疾病相关的MicroRNA-21新型检测方法的建立

• 作者: 万家余 卜胜君 梁斌斌 王东霞 王奎宇 鞠传静
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: miRNA-21 心血管疾病 微小RNA 双链特异性核酸酶 杂交链式反应 DNAzyme 可视化检测
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 245-250
• 页数: 6页
• 分类号: Q789
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.03.0043

摘要

[目的]建立一种测定miR-21含量新型实验方法.[方法]利用microRNA-21(miR-21)作为靶标,并设计基于双链特异性核酸酶(Duplex specific nuclease,DSN)及杂交链式反应(Hybridization chain reaction,HCR)的探针MP、H1及H2,通过加入靶标从而引起DSN和HCR反应,达到双重信号放大的目的,最终信号输出方式为DNAzyme显色,裸眼可视,根据其产生颜色强度对靶标进行定量检测.[结果]DSN结合HCR靶标的最低检测限可达1 pmol/L,线性范围为1 pmol/L～1μmol/L,特异性良好,除靶标miR-21外,非特异性靶标均无明显信号产生,在人体血清实际样品中检测miR-21,其回收率可达到92.3％～101.5％.[结论]该检测方法成功建立测定miR-21含量的技术平台,灵敏性可达1 pmol/L,且特异性好、快速可视,为研究及临床诊断心血管疾病提供技术依托.