氯沙坦钾对棕榈酸所致骨骼肌细胞凋亡的干预作用

• 作者: 彭永德 李丽 李思雨 杨明 游利 潘凌 陈琳
• 来源期刊: 中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肌少症 氯沙坦钾 凋亡 自噬
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 595-601
• 页数: 7页
• 分类号: R681
• 字数: 4302字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-2591.2019.06.007

摘要

目的 从细胞水平探索氯沙坦钾对骨骼肌损伤的保护作用及其机制.方法 用2％马血清诱导分化L6成肌细胞;CCK-8试剂盒及Western Blot确定合适的氯沙坦细胞处理浓度.实验分为4组:对照组,二甲基亚砜组,棕榈酸(1 mmol/L)组以及棕榈酸(1 mmol/L)+氯沙坦钾(50μmol/L)组.Western Blot检测凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3、cleaved PARP、Bcl-2、Bax)、自噬相关蛋白(LC3、Beclin 1),实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测P53和P21 mRNA表达水平.结果 显微镜下观察及Western Blot检测myogenin蛋白表达增加,证明骨骼肌细胞诱导分化成功.CCK-8试剂盒检测示氯沙坦钾浓度为50、100、200、400μmol/L时L6成肌细胞活力分别为0.87±0.087、1.11±0.037、1.21±0.099、1.30±0.068,其中50μmol/L时细胞活力最大,且对cleaved caspase-3蛋白表达抑制最明显.与未作处理的对照组比较,qPCR显示棕榈酸处理组骨骼肌细胞P53、P21 mRNA表达量分别从0.36±0.03、0.50±0.05上调至0.68±0.08、1.07±0.02(P<0.05),cleaved caspase3、cleaved PARP蛋白表达均增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin 1蛋白表达减低;与棕榈酸单独处理组比较,氯沙坦钾与棕榈酸共处理组P53、P21 mRNA表达量分别从0.68±0.08、1.07±0.02下调至0.44±0.01、0.67±0.03(P<0.05),cleaved caspase-3、cleaved PARP蛋白表达减低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin1蛋白无显著改变.结论 氯沙坦钾通过抑制cleaved caspase3及其底物cleaved PARP表达抑制细胞凋亡,但这种保护效应并不是通过自噬途径实现的.