丝/苏氨酸蛋白激酶DNA甲基化在同型半胱氨酸致血管内皮细胞凋亡中的作用

• 作者: 刘志宏 姜怡邓 孙磊 张鸣号 徐华 杨晓玲 车双双 郭伟
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 同型半胱氨酸 丝/苏氨酸蛋白激酶 DNA甲基化 凋亡
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 709-714
• 页数: 6页
• 字数: 4531字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2019.05.007

摘要

目的 探讨丝/苏氨酸蛋白激酶(MST1)DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)致血管内皮细胞凋亡中的作用.方法 培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),用100 μmol/L Hcy干预48 h.MTT法检测HUVECs的存活率;Hoechst染色观察HUVECs的凋亡情况;Western blot检测MST1、Bcl-2、BAX和DNMT1的蛋白表达;巢式降落式PCR(nMS-PCR)法检测MST1启动子区DNA甲基化改变.结果 与正常对照组相比,Hcy处理后HUVECs的存活率明显降低(P＜0.01);Hoechst 33258染色后Hcy组可见核固缩、凋亡小体等典型的凋亡形态学特征;Western blot检测BAX的蛋白表达增加了1.23倍,而Bcl-2的蛋白表达及Bcl-2/BAX明显下调(P＜0.05);MST1的蛋白表达升高(P＜0.01),与Bcl-2/BAX呈负相关(r2=0.8446,P＜ 0.001);同时,MST1 DNA甲基化水平及DNMT1蛋白表达下降(P＜0.01).结论 MST1表达增高可能在Hcy致HUVECs凋亡中发挥重要作用,而DNMT1表达下调引起的MST1启动子区DNA低甲基化可能是其表达增高的重要机制.