毒胡萝卜素通过ATF6途径促进柯萨奇病毒B3复制的初步研究

• 作者: 刘宓 史冰田 夏冬 夏志强 宋娟 宋芹芹 曹天宇 王文军 程恒顺 罗小暖 韩俊
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 关键词: CoxsacievirusB3 毒胡萝卜素 内质网应激 噬斑 ATF6通路
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 244-247
• 页数: 4页
• 字数: 3132字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2019.03.004

摘要

目的 探讨内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)对柯萨奇病毒B3(coxsachievirus B3,CV-B3)病毒复制的影响.方法 将10个MOI的病毒感染HeLa细胞后,在病毒的吸附和补液过程中加入0.25μmol/L的TG,分别在药物刺激的3 h、6 h和9 h收集病毒感染的样品.通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CV-B3病毒复制效率;分别使用0.25μmol/L、0.08μmol/L和0.025μmol/L的TG刺激CV-B3病毒感染细胞,通过噬斑形成试验进一步验证TG对病毒复制的影响;通过内质网应激3条通路的抑制剂分别作用于TG刺激的病毒感染细胞,通过qRT-PCR检测病毒量的变化.结果 qRT-PCR结果显示,TG刺激后,相对于对照,病毒量在3 h没有发生明显的变化;在病毒感染的6 h和9 h,病毒量分别增加了2.5倍和158.6倍.噬斑形成试验显示,TG作用后,病毒的噬斑明显增大.通过加入内质网应激的3条通路PERK、ATF6和IRE1的抑制剂GSK2656157、AEBSF和STF-083010发现,加入ATF6的抑制剂AEBSF 6 h后,病毒增加量下降了90％;AEBSF作用9 h后,病毒增加量下降了55％.结论 TG能够通过ATF6途径诱导内质网应激并有效的促进CV-B3病毒的复制.