CRISPR/Cas13b系统对猪流行性腹泻病毒增殖的抑制作用

• 作者: 吴珍芳 杨化强 梅彦
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 猪流行性腹泻病毒 CRISPR/Cas13b系统 打靶质粒 RNA病毒 基因编辑
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: S813.3
• 字数: 4769字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.201811022

摘要

[目的]猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种对养猪业造成巨大损失的高致死率的传染性疫病.CRISPR/Cas13b系统精准切割和编辑RNA的功能提供了一种靶向抑制RNA病毒的策略.本研究尝试利用CRISPR/Cas13b的RNA干扰功能对PEDV的基因组RNA进行切割,以探索一种新型的PEDV病毒抑制策略.[方法]设计了4对靶向PEDV基因组不同区域的CRISPR RNA(crRNA)位点,构建了CRISPR/Cas13b打靶载体,以打靶载体转染Vero细胞,并利用PEDV感染转染细胞,检测PEDV在CRISPR/Cas13b转染细胞内的增殖情况.[结果]CRISPR/Cas13b系统对PEDV在Vero细胞的增殖具有明显的抑制作用.打靶载体U6-crRNA3和U6-crRNA4转染组相较于正常细胞组,病毒免疫荧光试验中荧光团明显减少;定量PCR结果显示,打靶载体转染组在细胞水平抑制50％ 以上病毒增殖量.[结论]本研究构建的CRISPR/Cas13b系统能有效抑制PEDV增殖,为开发有效的RNA病毒防控手段、建立抗病动物模型提供了新的研究策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴珍芳	华南农业大学动物科学学院	56	312	9.0	15.0
3	杨化强	华南农业大学动物科学学院	5	7	1.0	2.0
5	梅彦	华南农业大学动物科学学院	1	1	1.0	1.0