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摘要:
目的 建立一种便捷、高效的人皮肤成纤维细胞体外培养技术,获得大量高纯度原代细胞.方法 取健康成年男性包皮标本,去除皮下组织,将皮肤剪成小皮片,以0.25%的胰蛋白酶溶液4℃消化过夜后分离去除表皮;将真皮组织剪碎,加入0.1%胶原酶Ⅱ溶液后于37℃CO2孵育箱中消化3~4h,筛网过滤,收集滤液后离心、培养.绘制细胞生长曲线,HE染色观察细胞形态,细胞免疫荧光、Westernblot检测Vimentin鉴定成纤维细胞,取第3代、第6代细胞以流式细胞术检测细胞纯度.结果 获得原代人皮肤成纤维细胞;细胞生长周期:0~2 d为潜伏期,2~5d为指数生长期,之后进入平台期;细胞为梭形或星形;Vimentin表达呈阳性,鉴定为成纤维细胞;第3代、第6代成纤维细胞纯度分别为95.82%、99.51%.结论 利用双酶联合消化法成功培养高纯度原代人皮肤成纤维细胞,为进一步研究奠定基础.
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 双酶联合消化法培养人皮肤成纤维细胞
来源期刊 中国皮肤性病学杂志 学科 医学
关键词 皮肤 成纤维细胞 原代培养 酶消化法
年,卷(期) 2019,(7) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 772-775
页数 4页 分类号 R751
字数 语种 中文
DOI 10.13735/j.cjdv.1001-7089.201812083
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘原君 65 208 7.0 9.0
2 刘全忠 170 703 11.0 17.0
3 范丽云 6 14 2.0 3.0
4 齐蔓莉 45 177 7.0 10.0
5 王敬 13 41 5.0 5.0
6 孔杰 8 15 3.0 3.0
7 韩珑 4 5 1.0 2.0
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研究主题发展历程
节点文献
皮肤
成纤维细胞
原代培养
酶消化法
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国皮肤性病学杂志
月刊
1001-7089
61-1197/R
大16开
陕西省西安市西五路157号
52-17
1987
chi
出版文献量(篇)
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21
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