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双酶联合消化法培养人皮肤成纤维细胞
双酶联合消化法培养人皮肤成纤维细胞
作者:
刘全忠
刘原君
孔杰
王敬
范丽云
韩珑
齐蔓莉
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
皮肤
成纤维细胞
原代培养
酶消化法
摘要:
目的 建立一种便捷、高效的人皮肤成纤维细胞体外培养技术,获得大量高纯度原代细胞.方法 取健康成年男性包皮标本,去除皮下组织,将皮肤剪成小皮片,以0.25%的胰蛋白酶溶液4℃消化过夜后分离去除表皮;将真皮组织剪碎,加入0.1%胶原酶Ⅱ溶液后于37℃CO2孵育箱中消化3~4h,筛网过滤,收集滤液后离心、培养.绘制细胞生长曲线,HE染色观察细胞形态,细胞免疫荧光、Westernblot检测Vimentin鉴定成纤维细胞,取第3代、第6代细胞以流式细胞术检测细胞纯度.结果 获得原代人皮肤成纤维细胞;细胞生长周期:0~2 d为潜伏期,2~5d为指数生长期,之后进入平台期;细胞为梭形或星形;Vimentin表达呈阳性,鉴定为成纤维细胞;第3代、第6代成纤维细胞纯度分别为95.82%、99.51%.结论 利用双酶联合消化法成功培养高纯度原代人皮肤成纤维细胞,为进一步研究奠定基础.
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文献信息
篇名
双酶联合消化法培养人皮肤成纤维细胞
来源期刊
中国皮肤性病学杂志
学科
医学
关键词
皮肤
成纤维细胞
原代培养
酶消化法
年,卷(期)
2019,(7)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
772-775
页数
4页
分类号
R751
字数
语种
中文
DOI
10.13735/j.cjdv.1001-7089.201812083
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
刘原君
65
208
7.0
9.0
2
刘全忠
170
703
11.0
17.0
3
范丽云
6
14
2.0
3.0
4
齐蔓莉
45
177
7.0
10.0
5
王敬
13
41
5.0
5.0
6
孔杰
8
15
3.0
3.0
7
韩珑
4
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2.0
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酶消化法
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
中国皮肤性病学杂志
主办单位:
西安交通大学
出版周期:
月刊
ISSN:
1001-7089
CN:
61-1197/R
开本:
大16开
出版地:
陕西省西安市西五路157号
邮发代号:
52-17
创刊时间:
1987
语种:
chi
出版文献量(篇)
9358
总下载数(次)
21
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