DENV-2感染的HUVECs与巨噬细胞相互作用对主要炎性细胞因子产生的影响

• 作者: 周恩正 左丽 来涛 毛佳璇 罗玉 陈俊豪
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 登革热病毒 人脐静脉内皮细胞 巨噬细胞 细胞因子 免疫调节
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 432-439
• 页数: 8页
• 字数: 5020字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2019.06.005

摘要

目的 观察原代人脐静脉内皮细胞(primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)被登革热2型病毒(dengue virus 2,DENV-2)感染后,与人外周血巨噬细胞(macrophages,M?)共培养,两种细胞主要炎性因子产生的变化.方法 密度梯度离心法从人体外周血浓缩白细胞中分离单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),贴壁得到单核细胞,通过巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激,流式细胞术检测CD14+CD11b+细胞纯度,得到M?.DENV-2感染HUVECs,real-time PCR检测HUVECs细胞内病毒NS1 mRNA表达量变化.HUVECs被DENV-2感染后,通过Transwell法与M?共培养,对照组用鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)1型特异性受体激动剂CYM-5442预处理24 h去除药物后感染病毒.Real-time PCR分别检测HUVECs产生的IL-6、IL-8 mRNA和M?产生的IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNA的逆转录水平;ELISA双抗体夹心法检测培养上清中上述细胞因子的表达.结果 HUVECs DENV-2被感染后,细胞内NS1基因转录水平逐渐上升,24 h时达峰值(2.66±0.53,P<0.05)后下降.流式细胞术检测M?纯度为(89.16±2.07)％.HUVECs被DENV-2感染后IL-6、IL-8 mRNA转录水平均上调,24 h mRNA转录量达到峰值;IL-6为16.10±0.17,IL-8为29.76±0.58.未感染组转录水平IL-6为1.46±0.67,IL-8为1.60±0.54.M?被感染后IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNA表达量均有明显上升,在24 h mRNA IL-6表达量为45.82±3.72,IL-8为52.34±1.69(12 h),TNF-α为28.94±1.75,IL-1β为30.96±1.44;未感染组转录水平IL-6为1.16±0.22,IL-8为1.15±0.21,TNF-α为1.11±0.09,IL-1β为1.47±0.31.HUVECs与M?共培养后上述细胞因子在各时间点的转录水平有所下降,依然明显高于未感染对照组.CYM-5442预处理后,共培养组感染的HUVECs IL-6、IL-8的mRNA转录水平明显下降(P<0.01),M?中IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNA转录水平也有下调(P<0.01).结论 DENV-2能够感染原代HUVECs,且被DENV-2感染的HUVECs能够活化M?并促使其分泌大量的IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β,同时活化的M?能一定程度地降低HUVECs炎症细胞因子的产生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	左丽	贵州医科大学免疫学教研室	23	43	4.0	5.0
2	陈俊豪	贵州医科大学免疫学教研室	6	5	2.0	2.0
3	罗玉	贵州医科大学免疫学教研室	3	3	1.0	1.0
4	来涛	贵州医科大学免疫学教研室	4	5	2.0	2.0
5	周恩正	贵州医科大学免疫学教研室	2	1	1.0	1.0
6	毛佳璇	贵州医科大学免疫学教研室	3	5	2.0	2.0