RASSF1A基因对乳腺癌细胞恶性生物学特征的作用研究

• 作者: 丁一博 张磊 李佳 杜旺 汤铜 贾文俊 郑璐 钱波 黄赞
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RASSF1A基因 乳腺癌 MCF-7 增殖凋亡
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 882-886
• 页数: 5页
• 分类号: R346
• 字数: 4250字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.06.010

摘要

目的 通过脂质体介导细胞转染,构建Ras相关区域家族1(RASSF1A)基因过表达的乳腺癌MCF-7细胞株,研究RASSF1A基因对乳腺癌MCF-7细胞株增殖、克隆形成、凋亡的作用.方法 构建RASSF1A过表达载体并鉴定,通过脂质体介导细胞转染将空载体及含有目的基因的重组载体转染到乳腺癌MCF-7细胞株中.分别通过荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR (RT-PCR)、Western Blot观察转染效率及确定最优转染条件.并通过四甲基偶氮唑盐法(MTT)、平板克隆、流式细胞术分别检测RASSF1A重组基因转染组、空载体转染组及空白细胞对照组细胞增殖、细胞克隆形成以及细胞凋亡的情况.结果 转染RASSF1A基因后的乳腺癌MCF-7细胞株出现该基因mRNA及蛋白质水平显著提升,证明RASSF1A基因过表达的MCF-7细胞株构建成功.MTT、平板克隆及流式细胞术检测结果显示:与对照组相比,RASSF1A基因过表达的MCF-7细胞株增殖、克隆形成能力受到抑制,而细胞凋亡率增加.结论 成功构建了RASSF1A基因过表达的MCF-7细胞株,RASSF1A基因可能参与了乳腺癌MCF-7细胞株增殖、凋亡的调控,其机制可能与抑制BC细胞增殖、促进凋亡有关.