不同小鼠肝炎病毒对ELISA方法检测其血清抗体的影响

• 作者: 吴朋朋 师长宏 张彩勤 白冰 苗海港 赵勇
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠肝炎病毒 血清学 酶联免疫吸附实验(ELISA)
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 15-22
• 页数: 8页
• 分类号: R-33
• 字数: 7305字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6179.2019.06.004

摘要

目的 建立小鼠肝炎病毒(Mouse Hepatitis Virus,MHV)血清抗体ELISA检测方法,用于本地区MHV的日常监测,以便对SPF小鼠感染状况及时作出判断.方法 选取3种MHV毒株MHV1、MHV-JHM和MHV-A59,通过L929细胞扩增培养获得纯化浓缩抗原并筛选适合包被抗原类型;免疫BALB/C小鼠,获得高效价免疫阳性血清;优化ELISA反应体系建立规范化的ELISA试剂盒并用于临床小鼠血清样品的检测.结果 筛选出适合本地区的MHV包被抗原类型为MHV1,建立了病毒扩增及浓缩纯化方法,制备的MHV抗血清达到同批次大量高滴度的水平,可作为标准化质控血清.包被抗原、待检血清和酶结合物最佳工作浓度分别为4.0 μg/mL(10-7.73/0.1 mL TCID50)、1∶40和1∶4 000稀释;批次内和批次间平均变异系数分别为5.13％和5.57％;检测灵敏度为1∶4 000稀释;与小鼠仙台病毒(SV)、小鼠肺炎病毒(PVM)、呼肠孤病毒Ⅲ型(Re03)、小鼠细小病毒(MVM)和鼠痘病毒(Ect)阳性血清均无交叉反应.稳定性试验相对偏差小于10％.对165份血清样品进行检测,阳性血清相符率97.37％ (37/38),阴性血清相符率92.19％ (118/127).结论 本研究建立的ELISA方法检测小鼠血清MHV抗体具有较高的特异性、敏感性和结果可重复性,可以用于本地区MHV日常病原学监测,以便对小鼠感染状况作出准确判断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	师长宏	空军军医大学实验动物中心	10	4	1.0	2.0
2	吴朋朋	空军军医大学实验动物中心	2	3	1.0	1.0
3	白冰	空军军医大学实验动物中心	2	0	0.0	0.0
4	张彩勤	空军军医大学实验动物中心	4	3	1.0	1.0
5	赵勇	空军军医大学实验动物中心	3	3	1.0	1.0
6	苗海港	空军军医大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0