基于细胞感染的RT-qPCR法测定轮状病毒疫苗效力的方法验证

• 作者: 刘悦越 刘艳 周旭 国泰 张韵祺 杜加亮 王云瑾 王名强 赵岩 马超
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 轮状病毒 疫苗 效力测定 验证
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 532-537
• 页数: 6页
• 字数: 4939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2019.07.008

摘要

目的 对基于细胞感染的RT-qPCR法测定轮状病毒疫苗效力进行验证.方法 根据人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH)指导原则,对该方法的特异性、准确性、精密性、线性范围和耐用性进行验证.结果 该方法仅能扩增测定相应型别的轮状病毒株,具有特异性;该方法测定G2、G3、G4型轮状病毒效力的回收率为97％ ～108％;细胞板内和板间变异系数(coefficient of vari-ance,CV)在0～2.62％之间,同一工作日和不同工作日测定的样本结果CV值分别不超过1.76％和2.27％,两实验者之间的测定结果CV值不超过7.68％;该方法测定G2型轮状病毒的线性范围为4.4～6.5 UI,G3型的线性范围为3.9～8.3 UI,G4型的线性范围为3.5～8.1 UI;该方法采用第140～160代不同代次的细胞悬液,具有较好的耐用性.结论 基于细胞感染的RT-qPCR法具有较好的特异性、准确性、精密性、线性范围和耐用性,适用于多价轮状病毒活疫苗的效力评价.