琥珀酸调控小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞成骨分化的作用研究

• 作者: 徐峰 胡昊 魏坦军
• 来源期刊: 华南国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨质疏松症 琥珀酸 成骨分化 成骨前体细胞
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 669-672,703
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13730/j.issn.1009-2595.2019.10.003

摘要

目的 探讨琥珀酸调控小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1成骨分化的作用及其可能的机制研究.方法 配置0.01、0.10、0.50、1、2 mmol/L琥珀酸,分别处理MC3T3-E1细胞48h,采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl-diphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测各组细胞增殖能力.实验分为琥珀酸组和对照组,经成骨分化诱导7 d,采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测细胞成骨分化能力.经成骨分化诱导14 d,采用茜素红染色分析钙结节沉积数量.经成骨分化诱导7 d,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot分别检测两组MC3T3-E1细胞成骨分化相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的mRNA和蛋白的表达水平变化.结果 低浓度(0.01 mmol/L和0.10 mmol/L)琥珀酸组MC3T3-E1吸光度值与对照组差异无统计学意义(P>0.05),高浓度(0.50 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L)的琥珀酸组吸光度值均低于对照组(P<0.05或0.01).琥珀酸处理组(1 mmol/L)ALP活性低于对照组[(0.55±0.11)vs.(0.96±0.11),P<0.05];两组矿化钙结节统计结果显示:琥珀酸处理组钙结节数目低于对照组[(8.32±0.83)vs.(14.22±2.10),P<0.05].琥珀酸处理组MC3T3-E1成骨分化基因Runx2、OCN的mRNA相对表达量均低于对照组(P<0.05或0.01),琥珀酸处理组小鼠MC3T3-E1成骨分化基因Runx2、OCN的蛋白相对表达量均低于对照组(P<0.05).结论 琥珀酸可抑制小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞的增殖和成骨分化能力,其机制可能与抑制成骨分化相关Runx2和OCN基因表达相关.