慢病毒Hoxa3载体的构建及其对人脐静脉内皮细胞迁移和血管新生的影响

• 作者: 毕雪飞 陶贵周 黄建华
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 Hoxa3 人脐静脉内皮细胞 细胞迁移 血管新生
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 18-22
• 页数: 5页
• 分类号: R541
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2019.01.004

摘要

目的 构建慢病毒Hoxa3载体,观察其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的转染效率,研究其对细胞迁移和血管新生的影响,并探讨Hoxa3促进血管新生的机制.方法 以基因合成法从聚合酶链式反应文库获取人Hoxa3基因,酶切后插入慢病毒骨架载体,以三质粒联合转染293T细胞获得慢病毒Hoxa3载体,并进行滴度测定.转染HUVEC,获取最大转染效率.转染HUVEC后分对照组和慢病毒Hoxa3转染组,进行HUVEC迁移实验和小管形成实验,观察Hoxa3对HUVEC迁移和小管形成的影响.Western blot检测慢病毒Hoxa3载体转染HUVEC后尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)和基质金属蛋白酶14(MMP-14)蛋白表达的变化.结果 成功构建慢病毒Hoxa3栽体,病毒的滴度为8×1011 TU/L;30 MOI慢病毒载体对HUVEC的转染效率达到99％以上.Western blot结果显示慢病毒Hoxa3载体转染HUVEC后Hoxa3能够有效在HUVEC中表达.与对照组比较,慢病毒Hoxa3载体转染HUVEC后显著增强HUVEC的迁移和小管形成,显著增加uPAR和MMP-14蛋白的表达(P＜0.05).结论 成功构建的慢病毒Hoxa3载体可促进HUVEC的迁移和小管形成,其作用机制可能为上调HUVEC的uPAR和MMP-14蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶贵周	锦州医科大学附属第一医院心内科	36	99	6.0	9.0
2	毕雪飞	锦州医科大学附属第一医院心内科	2	0	0.0	0.0
3	黄建华	锦州医科大学附属第一医院心内科	8	8	2.0	2.0