摘要:
有机氯类农药为已确定的环境雌激素,易在体内蓄积产生慢性毒性危害人体健康.选择单一存在时无明显雌激素效应的残留剂量进行联合试验,观察联合作用后雌激素效应的增减.选取乳腺癌MCF-7细胞作为研究对象,对残留剂量下六氯苯(HCB)、β-六六六(β-BHC)和p,p'-滴滴涕(p,p'-DDT)联合后的雌激素效应机制进行了研究.首先,运用MTT法观察3种有机氯类农药残留剂量下单独和联合作用对MCF-7细胞生长的影响;然后,运用流式细胞仪测定有机氯类农药联合对MCF-7细胞周期的影响;之后,采用Western Blot法测定有机氯类农药联合后ERα、ERβ、ERK1/2、p-ERK1/2、Ki67、c-Myc和CyclinD1蛋白表达的变化.结果显示,β-BHC+p,p'-DDT组、HCB+β-BHC+p,p'-DDT组作用24 h后细胞增殖率为115.0% 、120.1%,作用48 h后增殖率为121.2% 、126.3%,其他联合组与对照相比未发生明显变化;β-BHC+p,p'-DDT组、HCB+β-BHC+p,p'-DDT组中MCF-7细胞的G1期细胞比例下降,S期细胞比例上升,细胞呈高增殖状态;β-BHC+p,p'-DDT组、HCB+β-BHC+p,p'-DDT组和雌二醇(E2)组作用48 h后,均降低ERα 的蛋白表达,升高ERβ 的蛋白表达,促进p-ERK1/2、Ki67、CyclinD1和c-Myc的蛋白表达.研究表明,在单一作用时不具有雌激素效应的残留剂量下,仅 β-BHC+p,p'-DDT联合组和HCB+β-BHC+p,p'-DDT联合组具有明显雌激素效应,其效应机制为经雌激素受体途径,激活ERβ 蛋白表达,抑制ERα 蛋白表达,促进p-ERK1/2、Ki67、c-Myc和CyclinD1等相关蛋白的表达.