黄瓜白粉病的PMA-qPCR方法建立及应用

• 作者: 何晓青 孔维文 张佐然 李云龙 李金婷 梁雅静
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 黄瓜白粉病 PMA-qPCR 标准曲线 臭氧处理
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 550-555
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.35
• 语种: 中文
• DOI: 10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2019.05.002

摘要

鉴于叠氮溴化丙锭(PMA)染料可辨别细菌活性,将其与实时荧光定量PCR(qPCR)相结合,建立PMA-qPCR方法,以检测黄瓜白粉病的活性致病菌.在黄瓜白粉菌核糖体DNA的ITS区设计引物,将扩增片段重组到pGM-Simple-T载体中构建标准质粒.以5×10～5×106个·μL-16个梯度稀释质粒来绘制标准曲线,并做组内和组间重复.(1)qPCR标准曲线显示有良好的扩增结果,其相关系数(R2)为0.994.(2)利用qPCR检测臭氧处理后PMA染料处理组和对照组中有活性的黄瓜白粉菌数量.结果显示,PMA染料处理组拷贝数为4.335×102个·μL-1,对照组拷贝数为9.448×106个·μL-1.(3)利用PMA-qPCR方法检测臭氧处理后的黄瓜叶片不同部位(全组织、表面、内部)活菌数占总菌数的比例,处理50 min后的活菌比例分别较处理前下降了58.8％、67.0％、48.0％.这表明该方法可快速鉴定黄瓜白粉病中的活性致病菌数量,为该病的预防和控制提供技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何晓青	北京林业大学生物科学与技术学院	28	214	8.0	14.0
2	孔维文	北京林业大学生物科学与技术学院	4	3	1.0	1.0
3	李金婷	北京林业大学生物科学与技术学院	3	1	1.0	1.0
4	张佐然	北京林业大学生物科学与技术学院	3	1	1.0	1.0
5	梁雅静	北京林业大学生物科学与技术学院	4	1	1.0	1.0