'黄冠梨'钾转运体基因PbKT8的克隆与表达分析

• 作者: 刘慧冉 徐阳春 李岩 杨晗 申长卫 石晓倩 董彩霞 谢昶琰
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄冠梨 PbKT8基因 亚细胞定位 酵母 表达分析
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 生物与环境
• 页码范围: 706-712
• 页数: 7页
• 分类号: S661.2
• 字数: 4864字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201812039

摘要

[目的]本文旨在克隆'黄冠梨'钾转运体PbKT8基因,对基因定位及表达特征进行初步分析,为其功能研究提供基础.[方法]从'黄冠梨'果实中克隆PbKT8基因的cDNA全长序列,利用生物信息学对其同源序列进行分析,构建含GFP载体并通过激光共聚焦显微镜精确定位蛋白位置,实时荧光定量PCR分析不同施钾处理下该基因在果实成熟期的表达特征.[结果]钾转运体PbKT8基因序列全长2328 bp,编码775个氨基酸,PbKT8蛋白与苹果(Malus domestica)进化关系最相近,同源序列相似性高达99.10％;亚细胞定位结果显示,PbKT8蛋白定位于细胞膜上;PbKT8基因转化酵母突变菌株R5421在低于5 mmol·L-1 K+培养基上恢复生长;qRT-PCR结果表明,PbKT8基因在果实和叶片中相对表达量随施钾水平增加而上升.[结论]PbKT8蛋白定位在质膜上具有转运钾离子的功能,在果实成熟期受高钾响应表达.