线性聚乙烯亚胺(LPEI)介导DNA转染的优化研究

• 作者: 乔冰珂 刘安芳 叶国根 赵建军 马兴宇
• 来源期刊: 西南大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 线性聚乙烯亚胺 核酸聚合 体外转染
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 农业与生命科学
• 页码范围: 28-36
• 页数: 9页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.13718/j.cnki.xdzk.2019.06.005

摘要

线性聚乙烯亚胺(LPEI)是一类广泛用于核酸转染或药物传递的阳离子聚合物.为了进一步探究25 kDaLPEI的转染条件,通过凝胶电泳阻滞试验评估N/P,聚合pH及聚合时间对LPEI-DNA复合物形成的影响,继而利用大范围N/P的25 kDa LPEI对HEK293 T细胞进行绿色荧光蛋白表达质粒转染,转染48 h后通过绿色荧光细胞比例及MTT的统计分析,评估转染效率与LPEI造成的细胞毒性.结果表明,N/P的上升能增强LPEI-DNA的电泳阻滞;随着共孵育pH值从6～8升高,LPEI-DNA聚合逐渐减弱;随着共孵育时间延长,LPEI-DNA聚合逐渐增强,孵育1h时达到饱和.随着体外转染HEK293 T细胞的N/P升高,转染阳性细胞比例逐渐升高,当N/P达到40～60时转染效率达到最高,进一步提高N/P后转染效率极显著下降(p＜0.01);随着N/P升高,细胞活力逐渐下降.结果表明,N/P,pH,聚合时间均可影响LPEI聚合核酸能力;综合考虑N/P对HEK293 T细胞转染效率及细胞毒性的影响,确定25 kDa ILPEI转染细胞适宜的条件为N/P为40～60,聚合pH值为6.0,聚合时间为1h.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘安芳	西南大学动物科学学院	23	59	6.0	7.0
2	马兴宇	西南大学动物科学学院	5	1	1.0	1.0
3	乔冰珂	西南大学动物科学学院	5	2	1.0	1.0
4	赵建军	西南大学动物科学学院	10	23	3.0	4.0
5	叶国根	西南大学动物科学学院	1	0	0.0	0.0