miR-616通过SFRP1调控骨肉瘤细胞增殖、凋亡的机制研究

• 作者: 徐峰 胡昊 魏坦军
• 来源期刊: 华南国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 微小RNA-616 细胞增殖 分泌型卷曲相关蛋白1
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 590-594
• 页数: 5页
• 分类号: R738.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13730/j.issn.1009-2595.2019.09.002

摘要

目的 探讨微小 RNA-616(miR-616)调控骨肉瘤 143B细胞增殖、凋亡的作用和机制.方法 采用瞬时转染miR-616 模拟物和抑制物分别上调或下调骨肉瘤 143B细胞的 miR-616 表达水平.瞬时转染 24、48、72 h 后,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测各时间点骨肉瘤 1 43B细胞的增殖能力.瞬时转染miR-6 1 6 抑制物下调miR-616 24 h后,采用流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡情况.采用Targetscan软件预测miR-616 靶基因,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测上调 miR-616 对靶基因mRNA的调控水平.结果 miR-616 上调组骨肉瘤 143B细胞在转染后24、48、72 h的吸光度值分别高于上调对照组,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01),miR-616 下调组骨肉瘤 143B细胞在转染后 24、48、72 h的吸光度值分别低于下调对照组,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).miR-616 下调组 143B细胞早期凋亡率和晚期凋亡率分别低于下调对照组,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).miR-616 可与分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,SFRP1)mRNA 3’端非编码区域(3’untranslated region,3’-UTR)的种子序列"CAAUGACA"结合.miR-616 上调组SFRP1 mRNA的相对表达量、Wnt信号通路家族3a(Wnt family member 3a,Wnt3a)mRNA 的相对表达量低于上调对照组,组间比较差异均具有统计学意义(P均＜0.05).结论 下调 miR-616 可抑制骨肉瘤细胞的增殖、促进其凋亡,而且,miR-616 可能的靶基因为 SFRP1.miR-616/SFRP1 信号轴可能作为骨肉瘤治疗的潜在靶点之一.