miR-145靶向TLR4对尖锐湿疣患者外周血单核细胞来源树突状细胞分泌IL-18和IL-10的影响

• 作者: 刘丽娟 宣晓梅 张国强 林琳 石丽平 董伟兰 陈立荣 靳慧
• 来源期刊: 中国皮肤性病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 尖锐湿疣 miR-145 TLR4 树突状细胞 IL-18 IL-10
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1001-1006
• 页数: 6页
• 分类号: R752.5+3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13735/j.cjdv.1001-7089.201810021

摘要

目的 探讨miR-145靶向TLR4对尖锐湿疣(CA)患者外周血单核细胞来源树突状细胞分泌IL-18和IL-10的影响.方法 收集40例CA患者作为CA组,40例健康人作为对照组(Con),采用ELISA法检测两组外周血中IL-18和IL-10的表达水平.流式细胞仪检测树突状细胞表型CD1a、CD83和CD80的表达率以鉴定树突状细胞的体外诱导结果,Western blot检测树突状细胞中TLR4蛋白表达,RT-PCR检测树突状细胞中miR-145和TLR4 mRNA的表达.转染miR-145 mimics和si-TLR4至CA患者外周血树突状细胞后,ELISA法检测上调miR-145和敲低TLR4表达对树突状细胞分泌IL-18和IL-10的影响.采用TargetScan生物学软件预测,双荧光素酶报告基因实验验证miR-145和TLR4的靶向关系.转染pcDNA3.1-TLR4载体后,观察上调TLR4表达对miR-145调控树突状细胞分泌IL-18和IL-10的影响.结果 树突状细胞诱导培养7d后,细胞表面成熟表型CD1a、CD83和CD80表达率显著升高,树突状细胞的体外诱导成功.与Con组相比,CA组外周血中IL-18、IL-10水平和树突状细胞中TLR4蛋白、mRNA的表达均显著升高,而miR-145的表达显著降低(P＜0.05).上调miR-145表达或敲低TLR4使树突状细胞分泌IL-18和IL-10含量降低.双荧光素酶报告基因实验证实TLR4是miR-145的靶基因.上调TLR4表达能够明显逆转miR-145对树突状细胞分泌IL-18和IL-10的抑制作用.结论 miR-145可通过靶向TLR4抑制CA患者外周血树突状细胞分泌IL-18和IL-10.