基于绵羊肺炎支原体EF-Tu蛋白间接ELISA方法的建立

• 作者: 张洁 曹军军 杨亚军 王小凤 王璐 石峰 祝明松
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊肺炎支原体 原核表达 EF-Tu蛋白 Western blot 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 6-13
• 页数: 8页
• 分类号: S852.62
• 字数: 6413字
• 语种: 中文

摘要

为解决绵羊肺炎支原体感染的预防问题,建立一种简单、快速、成本低的诊断方法,构建绵羊肺炎支原体EF-Tu基因原核表达载体,诱导纯化重组蛋白并用Western blot分析其反应原性,以重组蛋白为诊断抗原,建立绵羊肺炎支原体间接ELISA检测方法,评估其特异性和灵敏性.结果表明,构建的重组蛋白纯化后,经Western blot证实具有良好的反应原性;间接ELISA反应条件优化显示,抗原稀释度为0.25μg/mL,一抗最佳稀释浓度为1:50,最佳孵育时间为90 min,封闭液为50 g/L脱脂奶粉,二抗最佳稀释倍数为1:8000,最佳孵育时间为60 min,特异性与灵敏性良好;该方法与间接血凝法对100份血清进行检测,两者符合率为88.7％.说明试验建立的绵羊肺炎支原体间接ELISA检测方法可以推广使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石峰	石河子大学生命科学学院	18	57	4.0	7.0
2	张洁	石河子大学生命科学学院	57	127	7.0	9.0
3	杨亚军	石河子大学生命科学学院	9	4	1.0	2.0
4	曹军军	石河子大学生命科学学院	3	4	1.0	2.0
5	祝明松	石河子大学生命科学学院	2	4	1.0	2.0
6	王璐		2	4	1.0	2.0
7	王小凤	石河子大学动物科技学院	2	1	1.0	1.0