DC靶向适配体修饰的载铜绿假单胞菌DNA疫苗递送系统的构建及体外评价

• 作者: 何颖娜 余娴 岳瀚勋 石敏 黄仕琴
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 DNA疫苗 DC靶向 适配体 OprF
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 743-752
• 页数: 10页
• 分类号: Q782
• 字数: 6620字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20190616

摘要

构建了一种DC靶向适配体修饰的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)DNA疫苗递送系统.采用乙醇注入法制备阳离子脂质体,静电吸附法制备载pVAX1-OprF-VP22的阳离子脂质体(Lip-pOprF-VP22),探讨不同DOTAP/pDNA质量比的Lip-pOprF-VP22对pVAX1-OprF-VP22的包封效果、对DC2.4的细胞毒性及转染率,筛选最佳质量比的Lip-pOprF-VP22测定其粒径及Zeta电位;后插法制备DC靶向适配体修饰的载pVAX1-OprF-VP22的阳离子脂质体(Apt-Lip-pOprF-VP22),检测其转染DC2.4后OprF蛋白的表达量及对小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)成熟的影响.结果表明,Lip-pOprF-VP22随着DOTAP/pDNA质量比增加包封率逐渐增加,当质量比为5:1时即能很好的包封pVAX1-OprF-VP22;当Lip-pOprF-VP22作用于DC2.424 h或48 h后,不同质量比的Lip-pOprF-VP22对DC2.4的存活率均在80％以上;当DOTAP/pDNA质量比由2:1增加到10:1,转染率表现为先增加、后降低的趋势,其中DOTAP/pDNA质量比为4:1、5:1时转染率相对较高;当DOTAP/pDNA质量比为5:1时,Lip-pOprF-VP22粒径为(171.67±1.27)nm,Zeta电位为(11.30±0.57)mV;Apt-Lip-pOprF-VP22转染DC2.4后可表达更多OprF蛋白且可明显促进BMDCs的成熟.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何颖娜	河北中医学院药学院	15	45	4.0	6.0
2	岳瀚勋	重庆医科大学药学院生物化学与分子药理学重点实验室	2	1	1.0	1.0