miR-215-3p通过调控CXCR4逆转结肠癌HCT8细胞5-FU耐药的实验研究

• 作者: 宋志超 宋敏 王镇 菊凤武 阚方恭
• 来源期刊: 临床肿瘤学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌 miR-215-3p CXCR4 5-FU 耐药性
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 513-517
• 页数: 5页
• 分类号: R735.3+5
• 字数: 4662字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0460.2019.06.006

摘要

目的 探讨miR-215-3p对CXC结构趋化因子受体4(CXCR4)及CXCR4/RhoA信号通路的调控作用,以及对结肠癌HCT8细胞5-FU耐药的影响.方法 体外培养HCT8细胞和HCT8/5-FU耐药细胞分别作为HCT8组和HCT8/5-FU组,将miR-215-3p mimics转染至HCT8/5-FU细胞作为miR-215-3p组,转染无义序列为NC组.采用MTT法检测各组细胞增殖能力的改变,计算半数抑制浓度(IC50).采用双荧光素酶报告实验验证miR-215-3p与CXCR4的靶向关系.采用Western blotting法检测各组CXCR4/RhoA信号通路相关蛋白CXCR4、RhoA、PI3K、RhoGEF、PAK、PKN1和ROCK的表达水平.结果 5-FU对HCT8细胞和HCT8/5-FU细胞的IC50分别为19.98μmol/L和105.86 μmol/L.HCT8/5-FU的耐药指数为5.30.HCT8/5-FU组miR-215-3p表达水平为0.54±0.13,低于HCT8组(P＜0.05).miR-215-3p组miR-215-3p表达水平为1.49±0.22,高于NC组和HCT8/5-FU组(P＜0.05).1、3、9、27、81μmol/L 5-FU对miR-215-3p组HCT8/5-FU细胞增殖抑制率分别为(14.46±1.79)％、(20.37±2.64)％、(54.87±3.81)％、(79.51±3.67)％和(84.62±4.15)％;相同浓度下,miR-215-3p组细胞增殖抑制率高于HCT8/5-FU组和NC组(P＜0.05).miR-215-3p可抑制野生型CXCR4 3’-UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型CXCR4 3’-UTR的荧光素酶活性无影响.miR-215-5p组CXCR4、RhoA、PI3K、RhoGEF、PAK、PKN1和ROCK蛋白表达水平分别为0.41±0.07、0.34±0.08、0.82±0.15、0.29±0.04、0.39±0.06、0.30±0.03和0.51±0.08,均低于其余3组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 上调miR-215-3p表达可逆转HCT8/5-FU细胞株对5-FU的耐药性,其可能的作用机制可能与负性调控CXCR4/RhoA通路的活性有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋敏	山东淄博山东省淄博市第一医院肛肠外科	1	1	1.0	1.0
2	宋志超	山东淄博山东省淄博市第一医院肛肠外科	1	1	1.0	1.0
3	王镇	山东淄博山东省淄博市第一医院肛肠外科	1	1	1.0	1.0
4	菊凤武	山东淄博山东省淄博市第一医院肛肠外科	1	1	1.0	1.0
5	阚方恭	山东省淄博市第一医院肿瘤内科	1	1	1.0	1.0