下调Tim-3对肝癌干细胞自我更新能力及Wnt信号通路的影响

• 作者: 兰勇 王旭林 邢人伟 陈明
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Tim-3肝癌干细胞 自我更新能力 Wnt信号通路
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 83-88
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4705字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2019.06.020

摘要

目的 探讨Tim-3对肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)自我更新能力及Wnt信号通路的影响.方法 培养人肝癌细胞系HepG2、SMMC7721及正常干细胞系L02,流式细胞仪分选Nanog阳性(+)的肝癌干细胞;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Tim-3在3个细胞系中的mRNA表达水平及在肝癌干细胞中的mRNA表达水平;HepG2肝癌干细胞转染Tim-3 siRNA,荧光显微镜和光学显微镜检测转染率,Western blot法检测转染后Tim-3蛋白水平;qRT-PCR检测转染前后Tim-3、Wnt3、β-catenin的mRNA表达水平;细胞克隆形成试验和细胞成球试验检测转染前后HepG2肝癌干细胞的自我更新能力的变化.结果 qRT-PCR检测Tim-3在肝癌细胞系HepG2、SMMC7721中的mRNA表达显著高于正常肝细胞L02(P＜0.05);Tim-3在HepG2肝癌干细胞的表达明显高于肝癌细胞(P＜0.05);在SMMC7721肝癌干细胞与肝癌细胞比较Tim-3mRNA表达有低趋势;经荧光镜和光学显微镜观察,Tim-3 siRNA转染细胞良好;Western blot法结果表明,Tim-3蛋白水平在siRNA-451组细胞中的表达显著低于siRNA-750、siRNA-NC、未转染细胞(P＜0.05);转染后HepG2干细胞Tim-3、Wnt3、β-catenin的mRNA表达水平均显著下降;克隆形成实验和细胞球形成实验显示转染Tim-3 siRNA后,细胞的克隆形成能力和细胞球生长能力均显著降低(P＜0.05).结论 下调Tim-3表达水平后,可通过抑制Wnt信号通路,最终减弱肝癌干细胞的自我更新能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈明	台州市立医院肝胆胰外科	13	43	4.0	6.0
2	邢人伟	台州市立医院肝胆胰外科	11	15	3.0	3.0
3	兰勇	台州市立医院肝胆胰外科	3	1	1.0	1.0
4	王旭林	台州市立医院肝胆胰外科	4	30	2.0	4.0