CSFV与PRRSV双重RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 严玉霖 刘超英 单春兰 富国文 敖平星 景麟稀 李林 杨伟 王浩 茶金龙 赵汝 高利波 高斌 高洪
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 双重RT-PCR 检测方法
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 71-75
• 页数: 5页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3848字
• 语种: 中文

摘要

为建立能同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的RT-PCR方法,根据CSFV和PRRSV的保守区域各设计1对特异性引物,预期扩增片段大小分别为356和546 bp,通过对反应条件的优化及特异性、灵敏性和重复性试验,建立了CSFV和PRRSV的双重RT-PCR方法.结果 显示:该方法能特异检测CSFV和PRRSV的cDNA最低量分别为0.96、1.48 ng,而对猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒(PCV)检测结果均为阴性;利用建立的双重RT-PCR对云南省部分地区送检的174份疑似CSFV及PRRSV感染的病料进行检测显示,CSFV感染率为24.14％,PRRSV感染率为47.70％,CSFV与PRRSV的混合感染率为16.67％,检测结果与单一RT-PCR结果相一致,且具有良好的可重复性:利用免疫组织化学方法对部分检测结果加以验证,验证结果与检测结果均一致.本研究成功建立了CSFV和PRRSV双重RT-PCR检测方法,为二者的快速检测和分子流行病学调查提供了一种有效手段.