猪脑心肌炎病毒一步法RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 施开创 李军 杨荣 胡丽萍 莫胜兰 郑敏
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 猪 脑心肌炎病毒(EMCV) 3D基因 一步法RT-PCR
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 324-327
• 分类号: S858.28
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2011.03.023

摘要

[目的]实现快速、准确地对猪脑心肌炎进行临床诊断和病原学检测.[方法]根据GenBank中已发表的猪脑心肌炎病毒(EMCV)3D基因序列设计合成1对特异性引物,优化反应条件,建立了EMCV一步法RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行验证.[结果]一步法RT-PCR可以从EMCV BJC3株中扩增出与试验设计相符的286 bp特异性片段,而对猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、BHK-21正常细胞的扩增结果均为阴性;对EMCV BJC3株细胞毒的敏感度达到2 TCID50;对10份EMCV BJC3株细胞毒进行重复性检测,结果均一致;对207份临床疑似发病猪的病料进行检测,其阳性检出率为9.18%.[结论]所建立的EMCV一步法RT-PCR检测方法具有特异、灵敏、高效、快速等特点,可用于EMCV的临床检测及流行病学调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施开创		46	217	7.0	12.0
2	莫胜兰		31	109	6.0	9.0
3	郑敏		33	115	6.0	8.0
4	杨荣		10	35	3.0	5.0
5	胡丽萍		12	24	2.0	4.0
6	李军		21	69	6.0	7.0