双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒

• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 双重一步法RT-PCR
• 年，卷（期）: 2009,（27）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 12960-12961,13009
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 2563字
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)双重一步法RT-PCR检测方法,为病毒的早期快速诊断提供技术支持.[方法]根据2种病毒的外壳蛋白基因的保守序列分别设计两对特异性引物,并进行双重与单一RT-PCR对比试验.[结果]结果在健康蜘蛛兰被人工接种病毒后第10天和第21天用一步法RT-PCR方法分别获得CymMV和ORSV 与预期相符的约764和946 bp扩增产物条带;且双重一步法RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,出现两条与单一RT-PCR产物相对应的清晰条带,获得较理想的检出效果;扩增产物的核酸序列经BLAST分析,同源性均在85%以上,证实了检测结果的准确性.[结论]该方法具有更加灵敏、特异、快速和简便的特点,适合于两种主要兰花病毒的同时快速检测.