脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 付瑞 冯育芳 卫礼 岳秉飞 巩薇 李晓波 王吉 王淑菁 贺争鸣
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脑心肌炎病毒 反转录聚合酶链式反应 长爪沙鼠 小鼠
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 44-49
• 页数: 6页
• 分类号: R-332
• 字数: 5123字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671.7856.2013.007.011

摘要

目的 建立脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物EMCV的检测.方法 根据已发表的EMCV VP1基因序列设计合成引物.建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证.用该方法检测62只长爪沙鼠、12只小鼠.结果 建立的EMCV RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定.以EMCV RNA逆转录产物为模板,所能检测RNA最小模板浓度为4.1 pg/μL,可检测病毒最小滴度为10-7mL-1.经RT-PCR检测,62只沙鼠均为阴性;12只小鼠中有1只EMCV核酸阳性,测序结果与GenBank中EMCV标准株核苷酸序列进行比对,其同源性为85%.结论 建立的脑心肌炎病毒(EMCV)RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定,可用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物EMCV的检测.