小干扰RNA沉默ASK1对脂多糖诱导的人肺泡上皮A549细胞炎症反应的影响

• 作者: 卢志涛 周晓光 周晓玉 杨洋 杨远 洪慧 程锐 许卫东 贡永健 陶慧娴
• 来源期刊: 中华新生儿科杂志（中英文）
• 关键词: RNA,小分子干扰 炎症 细胞凋亡信号调节激酶1 脂多糖类 A549细胞
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 295-300
• 页数: 6页
• 字数: 4574字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2096-2932.2019.04.011

摘要

目的 探讨小于扰RNA (small interfering ribonucleic acid,siRNA)沉默细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)对脂多糖诱导的肺泡上皮A549细胞炎症反应的影响及机制.方法 利用脂多糖刺激A549细胞构建细胞炎症模型,应用脂质体转染siRNA沉默A549细胞ASK1表达,采用免疫印迹、实时荧光定量聚合酶链反应及酶联免疫吸附试验检测A549细胞ASK1、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)mRNA及蛋白的表达水平.结果 通过脂多糖诱导A549细胞炎症反应,实验组炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α表达较对照组显著增高,差异有统计学意义(P＜0.001),表明构建A549细胞炎症模型成功.干扰组ASK1mRNA、蛋白表达均明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),表明沉默ASK1成功.干扰组IL-6、IL-8及TNF-α mRNA表达(0.37±0.04、0.32±0.04、0.48±0.13)明显低于阴性对照组(1.04±0.11、1.22±0.19、0.93±0.14)和空白对照组(1.01±0.14、1.01±0.23、1.02±0.25),IL-6、IL-8及TNF-α蛋白表达(pg/ml)(122.6± 11.0、537.2±42.4、159.2±19.6)也明显低于阴性对照组(267.4±20.4、1 289.8±55.3、327.0±26.3)和空白对照组(246.6± 18.7、1 300.3±35.6、325.2± 18.3),差异有统计学意义(P＜0.05);阴性对照组和空白对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 siRNA沉默ASK1的表达可下调A549细胞IL-6、IL-8、TNF-α表达水平,提示ASK1可能参与调控脂多糖诱导的A549细胞炎症反应.