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摘要:
目的:探讨SD大鼠成骨细胞中微小RNA-218-5p(miR-218-5p)对骨硬化蛋白(SOST)表达的影响及其作用机制.方法:用生物信息学数据库RNAhybrid和TargetScan预测miR-218-5p靶向SOST基因;构建携带靶基因野生型及突变型3'-非翻译区的双萤光素酶报告基因质粒,采用脂质体Lipofectamine 2000包裹双萤光素酶重组质粒及miR-218-5p模拟物(mimic)或抑制剂(inhibitor),共转染293T细胞,应用双萤光素酶报告基因检测试剂盒测定萤光素酶活性;分离并培养SD大鼠成骨细胞,茜素红染色鉴定,设miR-218-5p mimic组、miR-218-5p inhibitor组及空白和阴性对照组,转染SD大鼠成骨细胞,RT-PCR检测SOST的mRNA表达,Western blot法检测SOST的蛋白表达水平.结果:双萤光素酶报告基因实验验证SOST是miR-218-5p的潜在靶基因;RT-PCR和Western blot实验结果示,SD大鼠成骨细胞转染miR-218-5p mimic后,SOST mRNA及蛋白表达均明显下调,转染miR-218-5p inhibitor后均明显上调,与空白及阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:miR-218-5p靶向SOST基因,从而下调SD大鼠成骨细胞SOST蛋白的表达.
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文献信息
篇名 miR-218-5p下调SD大鼠成骨细胞骨硬化蛋白的表达
来源期刊 中国病理生理杂志 学科 医学
关键词 骨硬化蛋白 成骨细胞 微小RNA-218-5p
年,卷(期) 2019,(4) 所属期刊栏目 短篇论著
研究方向 页码范围 749-752
页数 4页 分类号 R681|R363
字数 3094字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.04.027
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王维山 石河子大学医学院第一附属医院骨科中心 61 346 11.0 16.0
2 史晨辉 石河子大学医学院第一附属医院骨科中心 94 525 13.0 19.0
3 方钦正 石河子大学医学院第一附属医院骨科中心 14 61 4.0 7.0
4 叶林 石河子大学医学院第一附属医院骨科中心 6 4 1.0 2.0
5 菅永志 石河子大学医学院第一附属医院骨科中心 3 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
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骨硬化蛋白
成骨细胞
微小RNA-218-5p
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国病理生理杂志
月刊
1000-4718
44-1187/R
大16开
广东省广州市黄埔大道西601号
46-98
1985
chi
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