过表达YAP对过氧化氢诱导皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响

• 作者: 周发忠 张政 王露 陈华全 高丽
• 来源期刊: 中国皮肤性病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 皮肤成纤维细胞 凋亡 氧化损伤 YAP
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 501-506
• 页数: 6页
• 分类号: R751
• 语种: 中文
• DOI: 10.13735/j.cjdv.1001-7089.201808148

摘要

目的 研究过表达Yes相关蛋白(YAP)对过氧化氢(H2O2)诱导皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响.方法 皮肤成纤维细胞中转染pcDNA3.1-YAP质粒、对照pcD-NA3.1质粒,经过H2O2处理后记为pcDNA3.1-YAP+H2O2、pcDNA3.1+H2O2,同时设置不转染的皮肤成纤维细胞经H2O2处理后记为H2O2,以不做任何处理的皮肤成纤维细胞作为对照.Real-time PCR和Western blot方法检测细胞中YAP表达变化,MTT检测细胞增殖,2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平,钼酸铵比色法检测过氧化氢酶(CAT)活性,硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,二硫对二硝基苯甲酸比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,羟脯氨酸法检测胶原合成水平.结果 pcDNA3.1-YAP+H2O2细胞中YAP水平高于pcDNA3.1+H2O2和对照(P＜0.05).H2O2细胞增殖能力降低,LDH漏出率升高,细胞凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平升高,CAT活性、SOD活性、GSH-PX活性降低,细胞中MDA含量升高,胶原含量降低,与对照比较,差异有统计学意义(P＜0.05).pcDNA3.1-YAP+H2O2细胞增殖能力升高,LDH漏出率降低,细胞凋亡率降低,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平降低,CAT活性、SOD活性、GSH-PX活性升高,细胞中MDA含量降低,胶原含量升高,与pcDNA3.1+H2O2和H2O2比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 过表达YAP可以减轻H2O2诱导的皮肤成纤维细胞氧化损伤,减少细胞凋亡.