适用于生产H5N1流感疫苗的MDCK亚克隆细胞的筛选及检定

• 作者: 乐欣如 刘洋 喻刚 张家友 施金荣 杨晓明 赵巍 韩锡鑫 黄晓媛
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: MDCK细胞 H5N1流感病毒 致瘤性和致癌性
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 81-87
• 页数: 7页
• 字数: 5771字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2019.02.001

摘要

目的 筛选对H5N1流感病毒高度敏感、低致瘤性的MDCK细胞亚株,并对该细胞株进行全面的检定及分析.方法 通过极限稀释法获得细胞亚株,再对各细胞亚株进行血凝滴度、受体丰度和致瘤性检测,筛选出安全性好、敏感性高的细胞亚株,然后对所筛选细胞亚株进行全面的检定.结果 通过细胞克隆试验,共得到108株单细胞亚克隆株,经两轮血凝滴度初筛后得到3株细胞,再经致瘤性及受体丰度比较后选定一株亚克隆株G1作为备选细胞株.核型分析显示该亚细胞株染色体数目众数为78,未发现细菌、真菌、支原体及外源因子污染.裸鼠细胞致瘤性试验显示在观察期末接种部位病理解剖与阴性对照组无显著性差异,细胞未显示明显致瘤性.以细胞裂解物和细胞DNA接种裸鼠,均未致裸鼠产生结节,病理解剖显示与对照组无显著性差异,细胞未显示致癌性.结论筛选出的MDCK-G1亚细胞株符合安全性和敏感性的要求,具有用于大流行流感疫苗生产的潜在可能性.