生防假单胞菌Pf-5对秀丽隐杆线虫的毒性及其作用机制

• 作者: 伍辉军 娄志英 张露露 王云鹏 王暄 袁启明 顾沁 高学文
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 生防假单胞菌Pf-5 fitD基因 杀虫毒素 秀丽隐杆线虫
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 植物科学
• 页码范围: 827-834
• 页数: 8页
• 分类号: S435
• 字数: 6509字
• 语种: 中文

摘要

[目的]本文旨在研究生防假单胞菌(Pseudomonas protegens)Pf-5菌株的杀线虫活性,以及鉴定其产生的主要杀线虫活性物质.[方法]采用基于sacB基因的蔗糖致死无标记突变体系,构建Pf-5菌株的相关突变体;以模式线虫秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为作用对象,利用绿色荧光蛋白基因对菌株进行标记,研究菌株对秀丽隐杆线虫的致死效果;利用扫描和透射电镜研究Pf-5菌株杀线虫物质的作用机制.[结果]Pf-5菌株对秀丽隐杆线虫具有很强的致死活性,用不同浓度的Pf-5菌液处理线虫,48 h对秀丽隐杆线虫的致死中浓度(LC50)为4.92×107 CFU?mL-1,96 h LC50为3.58×106CFU?mL-1;处理48 h时,野生型Pf-5菌株对秀丽隐杆线虫的致死率达到73.57％,而突变体Pf-5ΔfitD的致死活性显著下降,只有25.04％;Pf-5菌株fitD基因的Delivery结构域和CROPS结构域缺失突变体对线虫的致死活性也显著下降,表明FitD蛋白是Pf-5菌株的主要杀线虫物质.扫描电镜结果表明,Pf-5菌株及其突变体都不会破坏线虫的体壁;透射电镜的结果则表明,Pf-5菌株导致线虫肠道绒毛变薄和脱落,而突变体Pf-5ΔfitD则没有此效果.[结论]生防假单胞菌Pf-5菌株中杀线虫物质为FitD蛋白,初步表明其作用位点在肠道部位.