抗人N端脑钠肽前体抗原表位分析及单克隆抗体的研制

• 作者: 井金苗 侯亚璐 吴萌 柳峰松 魏治静
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 人N端脑钠肽前体 B细胞抗原表位 单克隆抗体 间接ELISA法 抗体特性
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 762-767
• 页数: 6页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3375字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2019.06.006

摘要

目的:制备并鉴定特异性抗人N端脑钠肽前体(NT-proBNP)抗原表位的单克隆抗体.方法:通过Bepipred在线表位预测方法和Epitope Prediction System软件预测人NT-proBNP B细胞抗原表位,综合2种预测结果对比优化选取合适的2个表位肽段P1和P2,偶联KLH为免疫原,免疫BALB/c小鼠,选择血清效价较高的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合;经HAT筛选,间接ELISA法检测和有限稀释法进行亚克隆,得到阳性杂交瘤细胞株;采用体内诱生法制备腹水并用Protein G柱纯化抗体;经鉴定,对特异性最好的2株进行纯度、效价、亚型及亲和力的分析.结果:通过P2-KLH免疫获得的阳性杂交瘤细胞株1F9和P1-KLH免疫获得的阳性杂交瘤细胞株4H2能稳定分泌抗NT-proBNP单克隆抗体,纯度较高,能与NT-proBNP重组蛋白特异性结合,效价分别达到4×104、4×105,抗体亚型均为IgG1,相对亲和力常数分别为1.14×107和1.6×107 L/mol.结论:获得2株特性良好的单克隆抗体,可为下一步研制NT-proBNP检测试剂盒提供原材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴萌		32	79	5.0	7.0
2	柳峰松	河北大学生命科学学院	46	280	9.0	14.0
3	侯亚璐	河北大学生命科学学院	3	0	0.0	0.0
4	井金苗	河北大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
5	魏治静		4	0	0.0	0.0