应用芯片式数字PCR检测人血清中登革病毒载量

• 作者: 吴衍恒 师舞阳 杨淑欢 林金思 谢颖
• 来源期刊: 公共卫生与预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 病毒载量 数字PCR 芯片
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 分类号: R181
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2483.2019.03.004

摘要

目的 建立芯片式数字PCR绝对定量技术,用于登革病例血清中登革病毒载量绝对定量并分析载量变化情况.方法 选取发病1～7d登革实验室确诊病例血清样本,提取病毒RNA并逆转录为cDNA,取3μL或4.5μL cDNA,配制15μL反应体系,采用QuantStudio 3D Digital PCR Chip Loader仪器制作芯片,将芯片置于Dual Flat Block GeneAmp PCR System 9700运行PCR,最后在QuantStudio TM3D Digital PCR System中读取结果并应用QuantStudio TM 3D AnalysisSuite TM Software进行分析,根据实验稀释倍数计算血清中登革病毒载量.结果 芯片制作良好,有效孔数高,检测结果重复性较好,示病例发病第1～7d血清中的登革病毒载量分别是107.646,107.544,107.298,106.990,105.823,104.732,104.221 copies/mL.结论 应用芯片式数字PCR检测血清中登革病毒载量的方法可行,可应用于登革病毒载量的绝对定量.登革病毒载量随着病程的发展而降低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢颖		12	35	4.0	5.0
2	吴衍恒		10	16	3.0	3.0
3	师舞阳		5	14	3.0	3.0
4	林金思		3	2	1.0	1.0
5	杨淑欢		1	1	1.0	1.0