氟苯尼考耐药基因floR LAMP检测方法的建立及应用

• 作者: 冯世文 彭昊 曾芸 李军 潘艳 胡帅 贺会利 钟舒红
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 氟苯尼考耐药基因floR 环介导等温扩增 建立和应用
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 24-28
• 页数: 5页
• 分类号: S854.43|S859.7
• 字数: 4111字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2019.08.005

摘要

为建立快速、灵敏且可定量检测氟苯尼考耐药基因floR的环介导等温扩增方法(LAMP),根据GenBank登录的革兰阴性菌floR基因保守序列,利用PrimerExploerV4设计特异性LAMP引物,成功建立了快速检测氟苯尼考耐药floR基因的LAMP方法.该LAMP检测方法反应温度为63℃,反应时间为60 min,具有可实时监测反应、定量检测出floR基因的拷贝数,以及操作简便的特点,灵敏度高,检测限为6.24×100拷贝,是普通PCR的100倍.用建立的方法检测对氟苯尼考不同敏感性的大肠埃希菌floR基因,结果显示,对氟苯尼考敏感、中介和耐药的菌株均检测到floR基因,其拷贝数与菌株MIC相关,提示floR基因不仅存在于氟苯尼考耐药菌中.所建立的floR基因LAMP检测方法可为floR基因的监测,以及氟苯尼考耐药性产生和传播机制的研究提供新的技术手段.