洛克沙胂完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制

• 作者: 刘燕凯 刘红亮 周景明 张改平 王奇奇 王爱萍 祁艳华 马丽萍
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 洛克沙胂 3-氨基-4羟基苯胂酸 完全抗原 碳二亚胺法 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 97-102
• 页数: 6页
• 分类号: S816.7
• 字数: 3143字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.02.023

摘要

本研究以洛克沙胂(ROX)的结构类似物3-氨基-4-羟基苯胂酸(HAPA)为小分子半抗原,采用碳二亚胺法,分别将其与载体蛋白——牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原HAPA-BSA和检测抗原HAPA-OVA.经紫外光谱扫描及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后,以20 μg/只剂量的HAPA-BSA免疫BALB/c小鼠;选择血清效价高、敏感性强的小鼠,取脾脏进行细胞融合,制备杂交瘤细胞株.利用间接ELISA法筛选得到1株可以稳定分泌抗ROX单克隆抗体的细胞株,命名为G12;间接ELISA法测定其细胞上清效价为1:512,间接竞争ELISA测定其半数抑制浓度IC50为3.147 ng/μL.经小鼠体内诱生腹水,辛酸-硫酸铵法纯化获得纯度较高的单克隆抗体,间接ELISA测定其效价为1∶102 400,IC50为1.433 ng/μL,且具有良好的特异性.本试验成功合成了ROX人工抗原,并制备了可以分泌高敏感性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为ROX免疫学快速检测方法的建立奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王爱萍	郑州大学生命科学学院	48	183	8.0	11.0
2	马丽萍	郑州大学生命科学学院	7	94	3.0	7.0
3	张改平	郑州大学生命科学学院	20	40	4.0	6.0
4	周景明	郑州大学生命科学学院	33	141	7.0	10.0
5	祁艳华	郑州大学生命科学学院	26	56	5.0	6.0
6	刘红亮	郑州大学生命科学学院	8	11	3.0	3.0
7	刘燕凯	郑州大学生命科学学院	8	12	2.0	3.0
8	王奇奇	郑州大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0